Efeito do cilostazol na produção in vitro de ovinos

Autores

  • Jossimara de Melo Silva Universidade Federal do Vale do São Francisco https://orcid.org/0009-0002-5237-7152
  • Beatriz Cavalcanti de Freitas Universidade Federal do Vale do São Francisco https://orcid.org/0009-0002-1073-1555
  • William Matheus Souza Universidade Federal do Vale do São Francisco https://orcid.org/0000-0002-7701-2304
  • Damaris Raquel Pires dos Santos Universidade Federal do Vale do São Francisco
  • Érika Karoline de Oliveira Aureliano Universidade Federal do Vale do São Francisco
  • Andreza Mayara Carneiro Lima Universidade Federal do Vale do São Francisco https://orcid.org/0000-0001-6192-5937
  • Luana Kealy Pimentel de Oliveira Universidade Federal do Vale do São Francisco
  • Mabel Freitas Cordeiro Universidade Federal do Vale do São Francisco
  • Edilson Soares Lopes Júnior Universidade Federal do Vale do São Francisco https://orcid.org/0000-0002-4790-8134

DOI:

https://doi.org/10.35172/rvz.2023.v30.1519

Palavras-chave:

Embrião, MIV, FIV, Ovelha, PIV

Resumo

O objetivo deste estudo foi avaliar o efeito da inclusão de cilostazol no meio de maturação in vitro de oócitos sobre produção in vitro de embriões ovinos. Para isso, foram realizadas colheitas de oócitos oriundos de ovários obtidos em abatedouro por meio do método de aspiração folicular com bomba de vácuo. Os oócitos foram divididos em quatro grupos de maturação: grupo CON, onde os complexos cumulus oócitos foram imersos em TCM-199, suplementado com 500 UI de penicilina, 0,5 mg de estreptomicina, 1,25 µg de anfotericina, 0,2 mM de piruvato de sódio, 10% (v/v) de soro fetal bovino (SFB), 10 ng/mL de fator de crescimento epidérmico (EGF), 10 µg/m de FSH, 10 µg/mL de LH, 10 µg/mL de estradiol e 100 µM de cisteamina; e nos grupos CILO0,3; CILO1 e CILO10, os oócitos foram maturados no meio do grupo CON, mas sem a adição de cisteamina e suplementado com as concentrações de de 0,3; 1 e 10 µM , respectivamente. Após 24h, os oócitos foram avaliados quanto a presença ou não de células do cumulus e quanto ao grau de expansão e destinados à fecundação in vitro, em meio FIV, juntamente com espermatozoides. Após a FIV, os presumíveis zigotos seguiram para o cultivo in vitro. Foram avaliadas clivagens no dia 2, sendo dia 0 o dia do início do CIV. Os resultados foram expressos em porcentagem e as variáveis de expansão das células do cumulus e número de estruturas clivadas foram comparadas por meio do teste qui-quadrado do software Epi Info (Epi Info 7.2.5, Atlanta, GA, EUA, 2021). Os resultados foram considerados significativos quando P < 0,05. Em relação à expansão das células do cumulus, todos os grupos apresentaram 100% de expansão. Não houve diferenças significativas quanto ao grau de expansão das células do cumulus entre os grupos suplementados com cilostazol e cisteamina (P > 0,05), assim como não houve diferenças significativas entre as taxas de clivagem entre os grupos suplementados com cilostazol e cisteamina (P > 0,05).

Referências

Luedke FE, Lavach FL, Cassanta FG, Nunes LFN, Schlotefeld C, Paiva SM, Santos SI, Neves AP. Aspectos da produção in vitro de embriões bovinos no Brasil – revisão. Pesquisa Agropecuária Gaúcha. 2019;25(1/2):120–32. doi: 10.36812/pag.2019251/2120-132 DOI: https://doi.org/10.36812/pag.2019251/2120-132

Chaves MS, Silva JCF, Melo LM, Santos AS, Oliveira MAL, Freitas VJF. É possível incrementar o sucesso da PIVE em pequenos ruminantes? Revista Brasileira de Reprodução Animal. 2021;45(4):246–52. doi:10.21451/1809-3000.rbra2021.032 DOI: https://doi.org/10.21451/1809-3000.RBRA2021.032

Accardo C, Dattena M, Pilichi S, Mara L, Chessa B, Cappai P. Effect of recombinant human FSH and LH on in vitro maturation of sheep oocytes; embryo development and viability. Animal Reproduction Science. 2004;81(1–2):77–86. doi: 10.1016/j.anireprosci.2003.10.004 DOI: https://doi.org/10.1016/j.anireprosci.2003.10.004

Elahi F, Lee H, Lee Y, Park B, Lee J, Hyun S-H, Lee E. Cilostazol Improves Developmental Competence of Pig Oocytes by Increasing Intraoocyte Cyclic Adenosine Monophosphate Level and Delaying Meiotic Resumption. Reproduction in Domestic Animals. 2016;51(2):220–6. doi: 10.1111/rda.12669 DOI: https://doi.org/10.1111/rda.12669

Schultz RM, Montgomery RR, Belanoff JR. Regulation of mouse oocyte meiotic maturation: implication of a decrease in oocyte cAMP and protein dephosphorylation in commitment to resume meiosis. Developmental biology. 1983;97(2):264–273. doi: 10.1016/0012-1606(83)90085-4 DOI: https://doi.org/10.1016/0012-1606(83)90085-4

Racowsky C. Effect of forskolin on maintenance of meiotic arrest and stimulation of cumulus expansion, progesterone and cyclic AMP production by pig oocyte-cumulus complexes. Journal of reproduction and fertility. 1985;74(1):9–21. doi: 10.1530/jrf.0.0740009 DOI: https://doi.org/10.1530/jrf.0.0740009

Shimada M, Terada T. Roles of cAMP in regulation of both MAP kinase and p34(cdc2) kinase activity during meiotic progression, especially beyond the MI stage. Molecular reproduction and development. 2002;62(1):124–131. doi: 10.1002/mrd.10075 DOI: https://doi.org/10.1002/mrd.10075

Masciarelli S, Horner K, Liu C, Park SH, Hinckley M, Hockman S, Nedachi T, Jin C, Conti M, Manganiello V. Cyclic nucleotide phosphodiesterase 3A-deficient mice as a model of female infertility. The Journal of clinical investigation. 2004;114(2):196–205. doi: 10.1172/JCI21804 DOI: https://doi.org/10.1172/JCI21804

Sasseville M, Côté N, Guillemette C, Richard FJ. New insight into the role of phosphodiesterase 3A in porcine oocyte maturation. BMC developmental biology, 2006;6:47. doi: 10.1186/1471-213X-6-47 DOI: https://doi.org/10.1186/1471-213X-6-47

Vanhoutte L, Nogueira D, Dumortier F, De Sutter P. Assessment of a new in vitro maturation system for mouse and human cumulus-enclosed oocytes: three-dimensional prematuration culture in the presence of a phosphodiesterase 3-inhibitor. Human reproduction. 2009;24(8):1946–1959. doi: 10.1093/humrep/dep104 DOI: https://doi.org/10.1093/humrep/dep104

Albuz FK, Sasseville M, Lane M, Armstrong DT, Thompson JG, Gilchrist RB. Simulated physiological oocyte maturation (SPOM): a novel in vitro maturation system that substantially improves embryo yield and pregnancy outcomes. Human Reproduction. 2010;25(12):2999–3011. doi: 10.1093/humrep/deq246 DOI: https://doi.org/10.1093/humrep/deq246

Sugimura S, Yamanouchi T, Palmerini MG, Hashiyada Y, Imai K, Gilchrist RB. Effect of pre-in vitro maturation with cAMP modulators on the acquisition of oocyte developmental competence in cattle. Journal of Reproduction and Development. 2018;64(3):233–241. doi: 10.1262/jrd.2018-009 DOI: https://doi.org/10.1262/jrd.2018-009

Xiong X-R, Lan D-L, Li J, Lin Y-Q, Li M-Y. Supplementation of cilostazol during in vitro maturation enhances the meiosis and developmental competence of yak oocytes by influencing cAMP content and mRNA expression. Animal Reproduction Science. 2017;186:21–30. doi: 10.1016/j.anireprosci.2017.08.013 DOI: https://doi.org/10.1016/j.anireprosci.2017.08.013

Li M, Yu Y, Yan J, Yan L-Y, Zhao Y, Li R, Liu P, Hsueh AJ, Qiao J. The Role of Cilostazol, a Phosphodiesterase 3 Inhibitor, on Oocyte Maturation and Subsequent Pregnancy in Mice. Wang H, editor. PLoS ONE. 2012;7(1):e30649. doi: 10.1371/journal.pone.0030649 DOI: https://doi.org/10.1371/journal.pone.0030649

Freitas VJF, Melo LM. In vitro embryo production in small ruminants. Revista Brasileira de Zootecnia. 2010;39:409–13. doi: 10.1590/s1516-35982010001300045 DOI: https://doi.org/10.1590/S1516-35982010001300045

Aghaz F, Hajarian H, Shabankareh HK, Abdolmohammadi A. Effect of sericin supplementation in maturation medium on cumulus cell expansion, oocyte nuclear maturation, and subsequent embryo development in Sanjabi ewes during the breeding season. Theriogenology. 2015;84(9):1631–5. doi: 10.1016/j.theriogenology.2015.08.013 DOI: https://doi.org/10.1016/j.theriogenology.2015.08.013

Li HJ, Sutton-McDowall ML, Wang X, Sugimura S, Thompson JG, Gilchrist RB. Extending prematuration with cAMP modulators enhances the cumulus contribution to oocyte antioxidant defence and oocyte quality via gap junctions. Human Reproduction. 2016;31(4):810–21. doi: 10.1093/humrep/dew020 DOI: https://doi.org/10.1093/humrep/dew020

Park B, Lee H, Lee Y, Elahi F, Lee J, Lee ST, Park CK, Hyun SH, Lee E. Cilostamide and forskolin treatment during pre-IVM improves preimplantation development of cloned embryos by influencing meiotic progression and gap junction communication in pigs. Theriogenology. 2016;86(3):757–65. doi: 10.1016/j.theriogenology.2016.02.029 DOI: https://doi.org/10.1016/j.theriogenology.2016.02.029

Jee BC, Chen H-Y, Chian R-C. Effect of a phosphodiesterase type 3 inhibitor in oocyte maturation medium on subsequent mouse embryo development. Fertility and Sterility. 2009;91(5):2037–2042. doi: 10.1016/j.fertnstert.2008.03.041 DOI: https://doi.org/10.1016/j.fertnstert.2008.03.041

Zeng H-T, Richani D, Sutton-McDowall ML, Ren Z, Smitz JEJ, Stokes Y, Gilchrist RB, Thompson JG. Prematuration with Cyclic Adenosine Monophosphate Modulators Alters Cumulus Cell and Oocyte Metabolism and Enhances Developmental Competence of In Vitro-Matured Mouse Oocytes1. Biology of Reproduction. 2014;91(2). doi: 10.1095/biolreprod.114.118471 DOI: https://doi.org/10.1095/biolreprod.114.118471

Gulo FDK, Karja NWK, Setiadi MA. Cysteamine in Maturation Medium Enhances Nuclear Maturation and Fertilization Rate of Sheep Oocytes In Vitro. HAYATI Journal of Biosciences. 2020;27(4):290. doi: 10.4308/hjb.27.4.290 DOI: https://doi.org/10.4308/hjb.27.4.290

Wani AR, Khan MZ, Sofi KA, Lone FA, Malik AA, Bhat FA. Effect of cysteamine and epidermal growth factor (EGF) supplementation in maturation medium on in vitro maturation, fertilization and culturing of embryos in sheep. Small Ruminant Research. 2012;106(2–3):160–4. doi: 10.1016/j.smallrumres.2012.02.015 DOI: https://doi.org/10.1016/j.smallrumres.2012.02.015

Downloads

Publicado

2023-10-05

Como Citar

1.
de Melo Silva J, Cavalcanti de Freitas B, Souza WM, Pires dos Santos DR, de Oliveira Aureliano Érika K, Carneiro Lima AM, Pimentel de Oliveira LK, Freitas Cordeiro M, Soares Lopes Júnior E. Efeito do cilostazol na produção in vitro de ovinos. RVZ [Internet]. 5º de outubro de 2023 [citado 21º de novembro de 2024];30. Disponível em: https://rvz.emnuvens.com.br/rvz/article/view/1519

Edição

v. 30 (2023)

Seção

Artigos Originais

Licença

Licença Creative Commons
Este obra está licenciado com uma Licença Creative Commons Atribuição-NãoComercial 4.0 Internacional.