VARIAÇÕES METODOLÓGICAS NA CRIOPRESERVAÇÃO DE SÊMEN SEXADO DE BOVINOS

Resumo

O objetivo deste trabalho foi verificar os efeitos de três diferentes protocolos de refrigeração para a congelação de sêmen sexado bovino, pela citometria de fluxo. Foram utilizados dois ejaculados de 10 touros, após a colheita do sêmen este foi processado para a separação dos espermatozóides X e Y. Após a separação pelo citômetro, as amostras foram divididas em três grupos: controle (C), os espermatozóides eram depositados em meio sem glicerol e acondicionados a 5ºC/90 minutos; grupo 1 (G1), os espermatozóides eram depositados em meio sem glicerol e acondicionados a 18ºC/90 minutos; grupo 2 (G2), os espermatozóides eram depositados em meio com glicerol e acondicionados a 5ºC/90 minutos. Posteriormente as amostras eram envasadas em palhetas e submetidas à congelação. Após a descongelação foram avaliados os seguintes parâmetros espermáticos: análise da cinética espermática pelo sistema computadorizado (CASA), integridade das membranas espermáticas e potencial mitocondrial pela microscopia de epifluorescência. Para análise estatística dos dados utilizou-se ANOVA e teste Tukey quando necessário, com nível de significância p < 0,05. Em relação às análises da cinética espermática foi verificado que os valores obtidos de velocidade linear pelo grupo G1 (82,3µm/s) foram inferiores em relação ao G2 (90,5µm/s) e C (89,7µm/s); e para velocidade curvilinear, o grupo C (206,6µm/s) apresentou valores superiores a G1 (183,0µm/s), sendo G2 (194,2µm/s) similar a ambos. Já para integridade de membrana plasmática o grupo G2 (34,7%) apresentou valores significativamente inferiores ao C (39,4%) e G1 (41,6%), entretanto a função mitocondrial apresentou valores superiores para o grupo C (62,6%) em relação ao G1 (47,5%); sendo o G2 (51,1%) similar a ambos. Com relação aos resultados obtidos pode-se concluir que os três protocolos de refrigeração adotados para a congelação de sêmen sexado bovino apresentaram poucas variações. Assim novos estudos são necessários para aprimorar o procedimento de criopreservação de sêmen sexado bovino.