A SUBSTITUIÇÃO DO MEIO TCM PELO MEIO BARC, SUPLEMENTADO COM SFB, BSA OU PVA, PARA A MATURAÇÃO DE OÓCITOS BOVINOS IN VITRO, NÃO INCREMENTA A SUBSEQUENTE PRODUÇÃO DE BLASTOCISTOS.

Autores

  • Jéssica de Oliveira Caldeira
  • Diego Gouvêa de Souza
  • Renata Sanches Calegari
  • Daniela Martins Paschoal
  • José Mateus Sudano
  • Alicio Martins Júnior

Palavras-chave:

meio TCM, meio BArc, maturação de oócitos, bovinos

Resumo

O presente trabalho teve como objetivo verificar a influência do meio de cultivo de embriões bovinos “Beltsville Agriculture Research Center” (BARC), suplementado com SFB, BSA e PVA, separadamente, sobre a maturação de oócitos in vitro, evidenciada pela taxa de clivagem e formação de blastocistos em diferentes estágios de desenvolvimento. Três experimentos foram efetuados, de acordo com o seguinte delineamento experimental: exp.1: SFB foi adicionado ao meio BARC nas concentrações de 0, 5 e 10%; exp. 2: BSA foi adicionada ao meio BARC nas concentrações de 0, 4 e 8 mg/mL; exp. 3: PVA foi adicionado ao meio BARC nas concentrações de 0, 0,5 e 1 mg/mL. O meio de cultura TCM 199, acrescido de bicarbonato, piruvato, gentamicina, FSH, LH e SFB, foi utilizado como grupo controle. Os oócitos, obtidos de ovários de vacas sacrificadas em frigorífico, foram selecionados em meio PBS e, a seguir, maturados em meio BARC acrescido de FSH, LH, gentamicina e as respectivas macromoléculas. A seleção espermática foi realizada em gradiente de Percoll, utilizando o meio TALP para a FIV. A cultura in vitro dos embriões foi em meio SOF modificado; todas as etapas foram realizadas em incubadora de CO2 a 5%, a 38,7 ºC, atmosfera úmida, em ar. O número de oócitos que clivou e atingiu os estágios de blastocisto, blastocisto expandido e blastocisto eclodido foi registrado, respectivamente, as 72 e 168 horas pós-inseminação. ANOVA e teste de Bonferroni foram empregados para a análise estatística, com P<0,05 sendo considerado significativo. Maior porcentagem (P<0,05) de oócitos que clivaram foi observada no grupo TCM + SFB do que nos grupos maturados em meio BARC com SFB ou BSA, independentemente da concentração adotada. Contudo, a taxa de fertilização foi similar entre os grupos BARC + PVA com 1 mg/mL (85,7%) e TCM + SFB (90,8%). Diferença significativa (P<0,05) foi constatada entre os grupos para o desenvolvimento de blastocistos, com o grupo TCM + SFB produzindo um maior número de blastocistos, em diferentes estágios (resultados variando de 47,4 a 51,4%) em comparação com os grupos utilizando BARC + SFB (4,1 a 19,7%), BSA (1,4 a 5,6%) e PVA (5,7 a 10,6%). Concluindo, o meio BARC suplementado com diferentes fontes de macromoléculas não foi eficiente em promover adequada maturação dos oócitos bovinos in vitro, resultando em uma baixa taxa de fertilização e de produção de blastocistos, em comparação com o meio TCM + SFB.

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Publicado

2023-03-30

Como Citar

1.
Caldeira J de O, Souza DG de, Calegari RS, Paschoal DM, Sudano JM, Júnior AM. A SUBSTITUIÇÃO DO MEIO TCM PELO MEIO BARC, SUPLEMENTADO COM SFB, BSA OU PVA, PARA A MATURAÇÃO DE OÓCITOS BOVINOS IN VITRO, NÃO INCREMENTA A SUBSEQUENTE PRODUÇÃO DE BLASTOCISTOS. RVZ [Internet]. 30º de março de 2023 [citado 5º de outubro de 2024];21(1):127-38. Disponível em: https://rvz.emnuvens.com.br/rvz/article/view/1373

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