Desarrollo de Embriones Bovinos después de Maduración in vitro de Oocitos en Medio de Cultivo Complementado con Taurina o Glicina

Resumen

Este estudio ha sido realizado para investigar los efectos de suplementar taurina y glicina al medio de maduración in Vitro (MIV) de oocitos bovinos, evaluando el resultado del desarrollo embrionario. Folículos fueron aspirados y ovocitos con 3 a 4 camadas de células de cumulus y citoplasma homogéneo fueron lavados en TCM 199, junto con bicarbonato de sodio, piruvato de sodio, penicilina, PVA y HEPES. Grupos de 15 a 25 oocitos se maduraron en TCM 199, con FSH, LH y SFB, en presencia de la taurina o glicina, de acuerdo con la línea experimental. En el experimento 1, la taurina se añadió en concentraciones de 0 mM, 1 mM, 10 mM y 100 mM. La glicina (experimento 2) se utilizó en concentraciones de 0,67 mM, 10 mM y 100 mM. El medio TALP fue utilizado para el gradiente de Percoll y fertilización; después de 20 horas de coincubación, las células de cumulus se removieron y los presuntos cigotos fueron transferidos para el medio SOF-m. Oocitos y embriones fueron incubados a 39ºC, en atmósfera húmeda a 5% de CO₂. A las 72 y 120 horas pos-inseminación (h pi) el medio SOF-m se añadieron las gotas. Oocitos que fertilizaron y alcanzaron los estadios de mórula/blastocito (Mo/Bl), blastocito/blastocito expandido (Bl/Bx) y blastocito expandido/blastocito eclodido (Bx/Be) se registraron a las 72, 144, 168 y 192 h pi, respectivamente. Resultados se analizaron a través de ANOVA y test-t de Bonferroni, con P<0,05. No hubo diferencia significativa entre los grupos (experimento 1) para los porcentajes de fertilización, Mo/Bl, Bl/Bx y Bx/Be, con valores variando de 88,9 a 93,0%, 42,8 a 51,4%, 33,6 a 41,7% y 23,2 a 30,6% respectivamente. En el experimento 2, no se observó diferencia entre los grupos con relación a la fertilización (90,3 a 97,0%). Pero, más (P<0,05) Mo/Bl y Bl/Bx se produjeron con glicina en concentraciones de 0,67 (49,3 y 33,3%, respectivamente) y 10 mM (54,5 y 44,7%) que la de 100 mM (25,4 y 19,2%), mientras mayores porcentajes (P>0,05) de Bx/Be fueron observadas en el grupo 10 mM (36,7%) comparado con 100 mM (16,2%), com resultados similares al obtenido para el grupo controle (29,9%). Concluyendo, en las condiciones experimentales adoptadas, el adicionar de taurina o glicina al medio de MIV de oocitos bovinos no ejerció influencia en el desarrollo embrionario, como visto por las similares porcentajes de producción de embriones.